PROCEDIMIENTO DE OBTENCION DE UNA PROTEINA DE LA PLANTA CUCUMIS SATIVUS L., DENOMINADA CUSATIVINA, UTIL COMO INACTIVADOR DEL ACIDO RIBONUCLEICO E INHIBIDOR DE LA BIOSINTESIS DE PROTEINAS.

Abstract

COMPRENDE: (A) EXTRAER SEMILLAS SECAS DE CUCUMIS SATIVUS L. (B) FILTRAR, ACIDULAR EL EXTRACTO LIQUIDO, CENTRIFUGARLO Y CROMATOGRAFIARLO; (C) SOMETER EL FLUIDO OBTENIDO A CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO; (D) ELUIR LA COLUMNA CON UNA SOLUCION DE NACL Y NAPOSI4 SCHSI2 SC; (E) SOMETER A ULTRAFILTRACION LA PROTEINA ELUIDA, A CROMATOGRAFIA Y A CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO, OBTENIENDOSE FRACCIONES QUE SE CONCENTRAN POR ULTRAFILTRACION Y SE CROMTOGRAFIAN PARA DAR UNA FRACCION CONTENIENDO LA CUSATIVINA; (F) PURIFICAR LA CUSATIVINA MEDIANTE DIALISIS, CROMATOGRAFIA Y POSTERIOR LIOFILIZACION. APLICACION COMO INACTIVADOR DEL ACIDO RIBONUCLEICO E INHIBIDOR DE LA SINTESIS DE PROTEINAS CON POTENCIAL UTILIDAD EN LA TERAPIA DEL CANCER Y EL SIDA. DE LAS SEMILLAS DE LA PLANTA CUCUMIS SATIVUS L. SE HA OBTENIDO UNA PROTEINA QUE SE COMPORTA COMO INHIBIDOR CATALITICO DE LA BIOSINTESIS DE PROTEINAS TANTO DE SISTEMAS PROCARIONTES COMO EUCARIONTES. LA PROTEINA QUE DENOMINAMOS CUSATIVINA SE HA OBTENIDO Y PURIFICADO HASTA HOMOGENEIDAD ELECTROFORETICAMEDIANTE LOS SIGUIENTES PASOS: A) OBTENCION DE EXTRACTOS SALINOS A PARTIR DE SEMILLAS; B) OBTENCION DE EXTRACTOS ACIDIFICADOS A PARTIR DE LOS EXTRACTOS ANTERIORES; C) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE S SEPHAROSE FAST FLOW (PHARMACIA-LKB); D) ULTRAFILTRACION A TRAVES DE MEMBRANA YM-10 DE AMICON; E) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE SEPHADEX G 75 (PHARMACIA-LKB); F) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE CM SEPHAROSE FAST FLOW; G) ULTRACENTRIFUGACION A TRAVES DE MEMBRANA YM-10 DE AMICON; H) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE SUPERDEX 75-F.P.L.C. (PHARMACIA-LKB); I) DIALISIS; J) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE MONO-S (F.P.L.C., PHARMACIALKB); K) DIALISIS Y LIOFILIZACION DE LA PROTEINA RESULTANTE.