Ptc1, una serín-treonín fosfatasa que regula la señalización mediada por MAPKs y procesos morfogenéticos en "Saccharomyces cerevisiae" a través de su proteían adaptadora Nbp2

Resumen

La levadura Saccharomyces cerevisiae es un organismo que sirve como modelo de células eucarióticas para el estudio de múltiples aspectos de la fisiología celular, como son el ciclo celular, el crecimiento polarizado y la utilización de rutas de transducción de señales mediadas por MAPKs para responder a estímulos externos. En estas rutas existen reguladores negativos, entre los que se encuentran las serín/treonín fosfatasas PP2C, gracias a los cuáles se modula la duración e intensidad de la señal transmitida. Ptc1 es una de las proteín fosfatasas del tipo PP2C, que desempeña el papel de regulador negativo de la ruta de MAPK mediada por Hog1, actuando Nbp2 como proteína adaptadora de Ptc1 en dicha vía de señalización. En este trabajo hemos o bservado que la falta de Ptc1 o de Nbp2 provoca un fenotipo característico de alteración en la pared celular, y un aumento en la fosforilación de la MAPK Slt2 y del factor de transcripción Rlm1, tanto en condiciones basales como tras estimulación de la ruta CWI. Asimismo, la sobreexpresión de PTC1 reduce la cantidad de Slt2 fosforilado, lo que sugiere que esta fosfatasa se comporta como un regulador negativo de la ruta CWI. Ensayos de copurificación y de dos híbridos demuestran que el complejo P tc1-Nbp2 interacciona con Bck1, la MAPKKK de la ruta CWI, a través del dominio SH3 de Nbp2 y una región rica en prolinas de Bck1, preferentemente la que incluye las prolinas 809 y 812. Los ensayos de epistasis genética realizados indican que el sustr ato de Ptc1 en esta ruta de señalización se sitúa por encima de la MAPK Slt2, siendo por tanto una de las pocas proteín fosfatasas de levaduras que regula la señalización sobre un componentes distinto de la MAPK. Asimismo, Ptc1 se encuentra previnie ndo un entrecruzamiento entre las rutas HOG y CWI, ya que la elevada fosforilación basal de Hog1 que se observa en ausencia de Ptc1 depende de la actividad quinasa de Slt2 y de la correcta señalización a través de la ruta CWI. Para esta fosforilación es también necesaria la presencia de la MAPKK Pbs2, así como de componentes de la rama Sln1 de la ruta HOG. Los estudios fenotípicos llevados a cabo con dobles mutantes de PTC1 y otros genes implicados en señalización indican que la hiperactivación de ambas rutas de MAPKs contribuye al fenotipo de sensibilidad del mutante ptc1? a rojo Congo, y que las MAPKKs Mkk1 y Mkk2 no son totalmente redundantes en su función sobre la ruta CWI. Esta fosfatasa presenta también otras funciones celulares...