El gen doublesex de sciara (diptera, nematocera, sciaridae)

Résumé

La determinación sexual es un proceso que se conoce bien en Drosophila melanogaster. La caracterización molecular de los genes implicados y su organización jerárquica han sido establecidas, lo que constituye el punto de partida para el aislamiento de genes homólogos en otras especies de insectos y estudiar así los distintos mecanismos de determinación sexual existentes. A pesar de las diferencias en la señal primaria que controla el sexo, según la hipótesis de Wilkins (Wilkins, 1995) existiría u na convergencia en la cascada a nivel del gen que ocupa la última posición, el gen doublesex (dsx), que se transcribe en ambos sexos dando lugar a transcritos diferentes por un procesamiento alternativo. Se originan dos proteínas, DsxF y DsxM, que im ponen, respectivamente, un desarrollo tipo hembra y tipo macho al regular de forma antagónica la transcripción de los genes de cito-diferenciación sexual. En esta Tesis Doctoral se ha llevado a cabo el aislamiento y la caracterización de un gen en Sciara coprophila (Scdsx) homólogo al gen doublesex (dsx) encontrado en otros insectos. El gen Scdsx está formado por cuatro exones y tres intrones, y se transcribe, durante todo el desarrollo en los dos sexos dando lugar a cuatro productos de distinto tamaño por un procesamiento alternativo no específico de sexo. El transcrito mayoritario en machos codificaría una proteína putativa, ScDsxM221, de 221 aminoácidos, que carece de la región común del dominio OD2 presente en todas las proteínas DsxM caracterizadas hasta el momento. El transcrito más abundante en hembras codifica una proteína, ScDsxF273, de 273 aminoácidos, homóloga a la proteína DsxF de otros insectos. Las otras dos proteínas tipo hembra están muy poco representadas y se corresponden con proteínas ScDsxF273 truncadas. El transcrito primario de Scdsx sigue los dos patrones alternativos, de hembra y de macho, en los dos sexos, aunque la efectividad de estos dos patrones si parece ser específica de sexo, lo cual requeriría de la existencia de factores específicos, en hembras o en machos, que determinasen esas diferencias sexuales en la efectividad de los dos tipos del procesamiento. Al contrario de lo que ocurre en otros dípteros, en Sciara el procesamiento del transcrito primario del gen dsx es independiente de la proteína Transformer. Mediante la generación de un anticuerpo policlonal específico contra la región carboxilo-terminal de la proteína ScDsxF273 hemos determinado que dicha proteína está presente en...