Aislamiento y caracterización molecular de amebas de vida libre en perú

Zusammenfassung

Esta Tesis Doctoral ha sido realizada en el Instituto Universitario de Enfermedades Tropicales y Salud Pública de Canarias (IUETSPC), dentro del Departamento de Parasitología, Ecología y Genética de la Universidad La Laguna. La línea de investigación que se ha seguido está basada en la búsqueda de Amebas de Vida Libre (AVL) causantes de meningoencefalitis que son capaces de colonizar mucosa nasal de individuos sanos que viven en aéreas endémicas en las costas de Perú. Las amebas de vida libre principalmente del género Acanthamoeba y Balamuthia mandrillaris son causantes de enfermedades que comprometen el Sistema Nervioso Central (SNC), produciendo una meningoencefalitis granulomatosa letal en el 90% de los casos. La primera parte de este trabajo está referida a la búsqueda y genotipado de AVL colonizando mucosa nasal en individuos sanos de la costa desértica de Perú (Cabello-Vílchez et al., 2014). A partir de las muestras de lavado nasal de individuos sanos/voluntarios se aislaron AVL para luego caracterizarlas molecularmente a nivel de genotipo. Mediante el análisis de proteasas de estas cepas de Acanthamoeba se detectó la presencia de proteasas extracelulares, y su potencial capacidad patogénica, se demostró que muchas de estas cepas indicaron que son altamente patogénas (Cabello-Vílchez et al., 2014). Debido a que no existe un tratamiento estandarizado y/o terapia efectiva y que es muy posible que en Perú se presenten muchos casos sin que sea posible su detección por múltiples factores como el desconocimiento de la enfermedad y la baja frecuencia y especialmente la rareza de la enfermedad se consideró necesario evaluar la sensibilidad de algunas de las cepas aisladas (las que mostraron mayor potencial patogénico), a dos tratamientos de primera elección frente a las infecciones por AVL, voriconazol y clorhexidina (Martín-Navarro et al., 2013; Cabello- Vílchez et al., 2014). Interesantemente, algunas cepas aisladas de la mucosa nasal correspondieron a una serie de pacientes VIH/SIDA, a los que evaluamos la presencia de AVL en cavidad nasal y exploramos si hay colonización en las condiciones de inmunosupresión propias de estos pacientes. Entre las cepas de AVL identificadas se incluyen Hartmanella vermiformis (ahora renombrada como Vermamoeba vermiformis) (Cavalier-Smith y Smirnov et al., 2013) y Acanthamoeba genotipo T4. En el caso del aislamiento de Vermamoeba vermiformis se descubrió que presentaba una bacteria endosimbionte perteneciente a la especie Mycobacterium chelonae. Se postula que existe que esta bacteria pudo haber producido enfermedad pulmonar concomitante en la paciente, que previamente presentó tuberculosis (TBC) pulmonar activa y con tratamiento anti-retroviral para VIH con Terapia Antirretroviral de Gran Actividad (TARGA) y fármacos de primera línea para TBC (Cabello-Vílchez et al. 2014). Respecto a la búsqueda de otras AVL con capacidad patógena, se inició la búsqueda de Balamuthia mandrillaris en muestras de suelo en zonas endémicas (costas desérticas de Perú) con el hallazgo e identificación por cultivo y PCR de Balamuthia mandrillaris (Cabello-Vílchez et al 2014).