Desarrollo de biomarcadores citogenéticos y moleculares para su evaluación en moluscos bivaldos

Résumé

El ácido okadaico (OA) es el principal representante del grupo de las toxinas DSP (del inglés, Diarrheic Shellfish Poisoning), las más abundantes en Galicia, y las causantes de un gran impacto tanto en la industria pesquera como en la salud pública. Se ha identificado a los dinoflagelados de los géneros Dinophysis y Prorocentrum como los principales productores de estas biotoxinas, que se almacenan en el tejido de los moluscos bivalvos, y a través de ellos llegan a los consumidores. El objetivo de este trabajo es el estudio de los efectos citogenéticos y moleculares que ejerce el OA en diversos tipos celulares de la almeja fina Ruditapes decussatus y el mejillón Mytilus galloprovincialis, mediante la evaluación del ensayo del cometa, el desarrollo de genotecas de sustracción y análisis de los patrones de expresión génica mediante PCR en tiempo real. Nuestros resultados muestran que DNAt es un parámetro eficaz para el análisis del ensayo del cometa. Frente a un tratamiento de OA, células branquiales y hemocitos muestran una respuesta diferente, y los factores que parecen provocar un mayor efecto a nivel de daño genético son los tiempos de exposición cortos y las concentraciones bajas. Ambos tejidos, en mejillones, mostraron una respuesta consistente al tratamiento de depuración. Se han desarrollado seis genotecas de sustracción en hemolinfa, branquia y hepatopáncreas, mostrando cada una de ellas un perfil diferente en cuanto a la agrupación en categorías funcionales de los transcritos secuenciados. Además, se han identificado genes que presentan sobreexpresión o represión en respuesta a esta biotoxina en hemolinfa, branquia y hepatopáncreas, así como dos posibles biomarcadores para la detección temprana de la presencia de OA en el medio.