Caracterización de la función de Mhf1/2 (CENP-S/X) en la segregación y en la reparación del DNA de Schizosaccharomyces pombe

Resum

La apropiada segregación y reparación del material genético son esenciales para el mantenimiento de la estabilidad genómica desde levaduras hasta humanos. Los mecanismos que aseguran la distribución equitativa de los cromosomas durante la mitosis requieren el correcto ensamblaje del cinetocoro, que media el anclaje de los cromosomas a los microtúbulos mitóticos, ya que errores en estos anclajes podrían dar lugar a aneuploidías. Asimismo la reparación del DNA a través de la recombinación homóloga es imprescindible para la correcta segregación cromosómica durante la meiosis, y constituye una ruta clave en la reparación de roturas de doble hebra y en la recuperación de horquillas de replicación rotas o bloqueadas. En esta memoria se describe la función de Mhf1 (CENP-S) y Mhf2 (CENP-X) en la levadura de fisión Schizosaccharomyces pombe. Mhf1 y Mhf2 son dos proteínas de plegamiento tipo histona conservadas evolutivamente que forman complejos implicados tanto en la segregación como en la reparación del DNA. Por una parte, en este trabajo se demuestra que Mhf1 y Mhf2 son componentes constitutivos de la cromatina centromérica, que podrían formar parte de nucleosomas alternativos específicamente en la región centromérica encargada del ensamblaje del cinetocoro en S. pombe. Debido a la gravedad de los fenotipos presentados por los mutantes nulos de mhf1 y mhf2 se ha realizado una mutagénesis y se han obtenido mutantes condicionales que permitirán profundizar en la caracterización funcional de estas proteínas. En cuanto a la reparación del DNA, se describe que Mhf1 y la DNA helicasa Fml1 (FANCM) son reclutados a focos de reparación de forma interdependiente. Mhf1 y Fml1 parecen estar implicados tanto en la reparación de daño exógeno en el DNA generado tras la exposición a agentes genotóxicos, como en la reparación de daño fisiológico como el formado durante el intercambio del tipo sexual en S. pombe.