Evaluacion de la capacidad protectora de moleculas recombinantes de fasciola hepatica

Zusammenfassung

Este trabajo plantea disponer de una vacuna efectiva contra la fasciolosis, enfermedad animal y humana causada por el trematodo Fasciola hepatica. Probamos la utilización de proteínas unidas a ácidos grasos (FABP) y péptidos recombinantes derivados de estas, en nuevos sistemas de adaptación-adyuvados, y medimos si aumentan los niveles de protección obtenidos con anteriores sistemas utilizados. Los pasos que se siguieron en el desarrollo de este trabajo fueron: obtención y purificación de moléculas recombinantes unidas a ácidos grasos procedentes de Fasciola hepatica; diseño y expresión de péptidos reconocidos por linfocitos T derivados de la molécula recombinante Fh15; se ensayaron estas moléculas con nuevos productos adyuvados incorporando inmunomoduladores no tóxicos; Posteriormente se realizó una evaluación de la protección con diferentes protocolos de inmunización e infección, utilizando distintos modelos experimentales (conejo, cordero y ratón); y por último se estudió la respuesta inmunológica desencadenada por la aplicación de la vacuna analizando su balance Th1-Th2 y su evolución a lo largo de los experimentos realizados. Una vez realizados los experimentos, observamos que se obtuvo un alto grado de protección en conejos inmunizados con Fh15, efecto que se potencia al aumentar el intervalo de tiempo entre la vacunación y la infección; Los efectos positivos obtenidos en la vacunación con Fh15 en modelo ovino consisten en deficiencias en el desarrollo físico y biológico de los vermes, tanto disminución del tamaño del parásito como retraso en su maduración y disminución en el número de huevos producidos. Los experimentos utilizando un péptido recombinante derivado de Fh15, fusionado con glutation -S- transferasa muestran adecuados niveles de protección, similares en tres modelos experimentales diferentes. Los altos niveles de IgG2a detectados en ratones supervivientes vacunados tanto c