Obtención de mutantes de schizosaccharomyces pombe hipersensibles a equinocandina y calcoflúor. Caracterización de los genes ypt2+ y bgs3+

Resumo

Hemos obtenido mutantes de Schizosaccharomyces pombe hipersensibles a los antifúngicos Equinocandina B (LY280949) y Calcoflúor. El análisis genético de las mutaciones indicó que son mutaciones nucleares, monogénicas, recesivas y que pertenecen a 11 grupos de complementación. Se ha caracterizado el mutante ehs2-1. La mutación ehs2-1 se ha localizado cerca del marcador ade6, en el cromosoma III. Hemos clonado 2 genes, ypt2+ y bgs3+ por complementación del fenotipo de hipersensibilidad a los antifúngicos del mutante ehs2-1. Ambos genes son supresores de la mutación ehs2-1., ypt2+ está implicado en el último paso de la ruta de secreción. La presencia de una proteína Ypt2 defectuosa produce una serie de fenotipos relacionados con una construcción defectuosa de la pared celular, lo que implica un nueva función de ypt2 en la biosíntesis de la pared celular. También, se ha clonado el gen bgs3+ como otro supresor de la mutación ehs2-1.bgs3+ es un gen nuevo que presenta gran homología con los genes de la familia de beta(1-3)glucán sintasa (tanto de Saccharomyces cerevisiae como de S.pombe).bgs3+ codifica una presunta proteína integral de membrana y demostramos que es esencial para la viabilidad celular. La localización subcelular de la proteína Bgs3 está restringida a las zonas de crecimiento activo de la célula (polos y septo de división). Bgs3 podría estar implicada en la biosíntesis de la pared celular durante la elongación.