Factores gcd implicados en la biogenesis del arntj met ensaccharomyces cerevisiae

Abstract

En Saccharomyces cerevisiae la carencia de aminoácidos provoca la fosforilación del factor de iniciación elF2 que da lugar a una reducción en los niveles de formación del complejo ternario elF2.GTP.ARNtjMet. Esto conduce a una inhibición general de la traducción y a un incremento en la traducción de un ARNm específico que codifica para el factor transcripcional Gcn4p, cuya traducción depende de cuatro uORFs presentes en su secuencia leader y de varios factores reguladores en trans Gcnp y Gcdp. La mayoría de los factores GCD caracterizados tienen una función esencial en el inicio de la síntesis de proteínas. Gcd13p y Gcd15p se identificaron como nuevos represores de la traducción de GCN4. El análisis de los perfiles de polisomas de los mutantes gcd13 y gcd15 muestra un defecto general en la iniciación de la traducción y la combinación de las mutaciones gcd15 y gcd13 conduce a la letalidad sintética. Además, las mutaciones gcd13 y gcd15 reducen la transcripción de varios ARNt con mayor efecto sobre la síntesis del ARNtj Met. GCD15 y GCD13 codifican las dos subunidades mayores de la ARN polimerasa III en levaduras. La disminución de la expresión del ARNtj Met probablemente conduce a reducidos niveles del complejo ternario, explicando los defectos en la iniciación de la traducción general y la desrepresión de la traducción de GCN4 de estos mutantes. En la segunda parte de la memoria se muestra un estudio detallado del efecto de las mutaciones en GCD14 y la combinación de éstas con mutaciones en GCD10 y con la deleción de LHP1. Los mutantes gcd14 acumulan altos niveles de pre-ARNtj Met. La letalidad de la deleción de GCD14 es suprimida por alta dosis de uno de los ARNtj Met, indicando que la función esencial de Gcd14p se requiere para la biogénesis del ARNtj Met. Asímismo, se demuestra una cooperación funcional entre Gcd14p y Lhp1p en la biogénesis de un conjunto de transcritos de la ARN polime