Cdc6 y cdc14 participan en el inicio de la replicacion del dna en saccharomyces cerevisiae

Resumen

En eucariotas, la entrada en fase S es un proceso altamente regulado por el ciclo celular. El genoma se replica una vez por ciclo comenzando la síntesis de DNA en los orígenes de replicación. El proceso de inicio es el principal y primer control de la duplicación del genoma. Trabajos recientes en Saccharomyces cerevisiae apoyan que en el inicio de la replicación del genoma confluyen dos pasos diferentes y consecutivos: deben de formarse complejos pre-replicativos multiproteicos en los orígenes de replicación para, después, ser activados por fosforilación dependiente de S-CDK y CDC7. La proteína Cdc6 de Saccharomyces cerevisiae es necesaria para la formación de los complejos pre-replicativos que se requieren para la replicación del DNA. Hemos mostrado que la sobreexpresión de CDC6 en cepas deficientes en CDC28 o de una proteína mutante que carece de sitios putativos de fosforilación por Cdc28 producen re-replicación del genoma en ausencia de división celular. Cdc6 se acumula en algunos mutantes cdc28ts, produce diploidización de uno de ellos (cdc28-4) y se estabiliza en cepas deficientes en la ruta de proteolisis dependiente de ubiquitinación, cdc4-1 y cdc34-2, mostrando que Cdc6 se degrada de una forma dependiente de Cdc4p/Cdc34p, tras ubiquitinación, en fase S. Proponemos que la degradación de Cdc6 es parte del mecanismo por el que las células de S. cerevisiae limitan la replicación a fase S, aunque deben existir mecanismos alternativos mediados por complejos quinasa Cdc28-Clb previniendo la re-replicación. CDC14 es una fosfatasa, con papel en el inicio de la replicación in vivo ya que limitando su actividad desciende el número de orígenes activos. Nuestros resultados apoyan la idea de Cdc14 es parte del control que determina este número. Mostramos que CDC14 interacciona genéticamente con CDC6 sugiriendo que ambos genes cooperan controlando la activación de los orígenes cromosómicos en S. cerevisi