Caracterización de receptores cannabinoides en el pez cebra

Resumen

Las propiedades medicinales y analgésicas de la planta Cannabis sativa y sus distintos ingredientes psicoactivos, principalmente el (-)-9?-THC, han sido utilizados por la humanidad a pesar de los efectos psicotrópicos que conducen a la tolerancia y a la dependencia a sus efectos. La mayoría del conocimiento actual sobre los receptores cannabinoides se ha obtenido a partir de estudios realizados principalmente en mamíferos aunque quedan aún muchos detalles por investigar sobre las características del sistema cannabinoide a partir de otras especies de organismos. En esta tesis, demostramos que existen sitios de unión para ligandos cannabinoides, estéreo específicos y saturables, en el cerebro del pez Cebra (Danio rerio). Además, hemos aislado y caracterizado molecularmente dos nuevos receptores cannabinoides putativos en el pez Cebra, que presentan elevada homología con los receptors cannabinoides CB1 y CB2, respectivamente. Cb1 de pez Cebra se expresa principalmente en el cerebro, en todas las subdivisiones principales y Cb2 de pez Cebra se expresa en la periferia, aunque también en el cerebro y en la hipófisis (RT-PCR e HIS). Nuestros resultados a partir de estudios de unión con los ligandos [3H]-CP55940 y [3H]-WIN55212-2 nos han permitido identificar un sitio específico de unión para ambos ligandos a partir de membranas procedentes de cerebro de pez Cebra y también de células HEK-293 transfectadas de manera estable con el receptor Cb1 de pez Cebra. En los estudios de competición encontramos que solamente el WIN55212-2 es capaz de desplazar significativamente al propio [3H]-WIN55212-2 siguiendo el modelo que se ajusta a la existencia de dos sitios de unión. Por otra parte, el WIN55212-2, además de la anandamida, fue capaz de activar el receptor, mediante la inhibición de la concentración intracelular de cAMP.