Determinacion de caracteristicas de adsorcion en cromatografia de afinidad

Résumé

Los objetivos de esta tesis se centraron en estudiar el equilibrio de adsorción-desorción en reactor discontinuo de tanque agitado (Batch). Se observó un fenómeno de histeresis en el proceso, es decir, cuando el sentido de la fuerza iónica fue decreciente, los valores de las pseudoconstantes de equilibrio fueron diferentes a las obtenidas cuando el sentido de la fuerza iónica fue ascendente. El hecho de que las partículas de adsorbente presenten una elevada porosidad, hace que parte de la enzima se encuentre retenida en el interior de la particula sin estar realmente adsorbida. Para cuantificar este efecto se determinaron los coeficientes de partición y las constantes de equilibrio de adsorción en el interior de las particulas. Se estudió la cinetica de adsorción y transferecia de materia, obteniendo la constante de velocidad, asi como los coeficientes de difusión. Debido al efecto conocido de flexibilidad del brazo espaciador se estudió el equilibrio de adsorción en Batch empleando adsorbentes con brazos espaciadores de diferente longitud. Se hicieron, asimismo experimentos en columnas basadas en metodos dinamicos de impulso-respuesta con el fin de determinar las costantes correspondientes al proceso de adsorción y compararlas con las obtenidas previamente en tanque agitado. Por último se empleó un sistema combinado de adsorción en tanque agitado y elución en columna para separar una mezcla de Tripsina y L-asparaginasa.