Desarrollo de nuevos modelos de investigacion de los mecanismos de transporte ionico en la membrana mielinica

Resumo

La reciente implicacion de la membrana mielinica en procesos de transporte ionico y la carencia de modelos de estudio de transporte ionico a traves de la misma ha puesto de manifiesto la necesidad del desarrollo de estos metodos de investigacion. En este trabajo se han desarrollado tres aproximaciones experimentales a estos fenomenos. 1.- se ha puesto a punto un metodo de obtencion de vesiculas oligolamelares de mielina, cerradas, de un tamaño entre 150 y 200 nm, cuya composicion lipidica y proteica es similar a la de la mielina sin que se haya modificado la conformacion de la proteina. 2.- se ha obtenido un extracto lipidico a partir de mielina purificada cuya composicion cualitativa y cuantitativa es similar a la de la mielina, a partir del cual se han preparado liposomas, tanto multilamelares, que se formaron espontaneamente, como unilamelares grandes, en los que se han reconstituido los proteolipidos por dos metodos. 3.- se han llevado a cabo experimentos de patch-clamp en liposomas gigantes y vesiculas gigantes, que se prepararon a partir de los modelos anteriores (descritos en 1 y 2). Mediante patch-clamp se ha detectado por primera vez la presencia de canales ionicos en la membrana mielinica, que podrian participar en la regulacion ionica neuronal.