Regulación del inicio de la recombinación meiótica por actividad cdk en schizosaccharomyces pombe

Resumen

La regulación estricta de la formación de roturas de doble cadena (DSBs) durante la meiosis es crucial para mantener la estabilidad genómica en una situación fisiológica en la que el daño programado y su reparación se utilizan como fuente de recombinación (variabilidad genética), necesaria además para la correcta segregación de los cromosomas homólogos. Así, la formación de la roturas tiene que estar coordinada con la progresión por meiosis, y de hecho sólo ocurre una vez que el DNA se ha replicado, teniendo el checkpoint de fase S un papel clave en esta coordinación. La formación de DSBs la lleva a cabo Spo11 (Rec12 en S. pombe), una proteína conservada que presenta homología con topoisomerasas de tipo II. Sin embargo, Rec12 necesita un grupo de proteínas, colectivamente conocidas como proteínas accesorias, para ejercer su función. Estas proteínas, sin actividad conocida, forman en S. pombe los complejos conservados de pre-recombinación SFT y DSBC. Además, los LinEs (estructuralmente relacionados con el complejo sinaptonémico de otros eucariotas) determinan dónde se forman los DSBs y sirven de plataformas para la carga de los complejos de pre-recombinación. En esta Tesis hemos estudiado si la actividad CDK (cyclin-dependent kinase) que promueve la progresión por meiosis es, además, necesaria para la formación de DSBs y la recombinación meiótica, utilizando para ello aproximaciones tanto genéticas (ensayos de recombinación) como físicas (análisis de la formación de DSBs) y diferentes situaciones experimentales que reducen la actividad CDK. Además, puesto que las proteínas que forman los LinEs y los complejos de pre-recombinación presentan posibles sitios de regulación por CDK, hemos estudiado si esta actividad regula la formación de los LinEs y/o la carga de las proteínas accesorias de Rec12 como posible mecanismo de control de la formación de DSBs.