Caracterización funcional de los transportadores mitocondriales de la familia CaMC en "Saccharomyces cerevisiae"

  1. Cavero Martínez, Santiago
Supervised by:
  1. Jorgina Satrústegui Gil-Delgado Director

Defence university: Universidad Autónoma de Madrid

Fecha de defensa: 21 June 2004

Committee:
  1. José María Medina Jiménez Chair
  2. José Manuel Cuezva Marcos Secretary
  3. Eduardo Rial Zueco Committee member
  4. Juan Pedro García Ballesta Committee member
  5. Alonso Rodríguez Navarro Committee member

Type: Thesis

Teseo: 104740 DIALNET

Abstract

El transporte de metabolitos a través de la membrana interna mitocondrial es realizado por una serie de proteínas relacionadas pertenecientes a la superfamilia de los transportadores mitocondriales (MCF). Durante los últilmos años se han identificado varios miembros de esta familia en levaduras y seres humanos, incluyendo miembros de una subfamlia de transportadores mitocondriales dependientes de calcio (CaMCs), que presentan dominios de unión a calcio de tipo manos EF en sus dominios N-terminales. Aralar1 y Citrina son dos CaMCs humanos con una gran homología entre sí, y han sido recientemente caracterizados como isoformas del transportador mitocondrial de aspartato/glutamato (ACG), regulado por calcio en la cara externa de la membrana mitocondrial interna. Aralar1 y Citrina son los homólogos humanos de Agc1p, un miembro de la subfamilia CaMC en la levadura Saccharomyces cerevisiae (902 aa, ORF YPR021c), aunque su dominio N-terminal no presenta dominios de manos EF. Para investigar el papel fisiológico de Agc1p llevamos a cabo la disrupción del gen AGC1 en S.cerevisiae y estudiamos el mutante de disrupción resultante utilizando aproximaciones metabólicas convencionales así como resonancia magnética nuclear (RMN) de 13C. Nuestros resultados proporcionan evidencias de que Agc1p es el transplantador mictocondrial de aspartato/glutamato en levadura. Juega un papel en el metabolismo del nitrógeno y en la síntesis de la ornitina en mitocondrial y es requerido para el funcionamiento de la lanzadera rédox de malato-asparatto en S.cerevisae, una lanzadera de NADH necesaria para el crecimiento de la levadura con acetato y ácidos grasos como fuente de carbono. Yn1083p, otro miembro de la subfamilia CaMC, es el homólogo en levaduras de los SCaMCs humanos (Short Calcium Binding Mitochondrial Carriers), cuya función de transporte es aun desconocida, y presenta dominios de manos EF en su dominio N-terminal. Utilizando un mutan