Regulación de la expresión de B-F1-ATPasa y función supresora de tumores de la H+-ATP sintasa

Résumé

El complejo de la H+-ATP sintasa mitocondrial es necesario para la provisión de energía celular y para la ejecución eficiente del programa apoptótico. En esta tesis hemos estudiado tres temas relacionados con: 1,- La expresión de la subunidad beta de la H+-ATP sintasa en cáncer. 2,- El papel de la H+-ATP sintasa en muerte celular. 3,- La regulación de la expresión de la H+-ATP sintasa en células de mamífero. El análisis de los niveles de expresión de beta-F1-ATPasa en biopsias normales y tumorales de pacientes con cáncer de colon y de estómago sugiere que la competencia bioenergética de las mitocondrias de los tejidos tumorales se encuentra afectada. Estos resultados apoyan la hipótesis que Otto Warburg propuso a principios del siglo pasado según la cual esta alteración de la funcionalidad mitocondrial debe estar involucrada en la resistencia que estas células tumorales presentan frente a diversos estímulos apoptóticos. Hemos utilizado estaurosporina para inducir muerte celular programada en tres líneas celulares de hígao de rata (C9, FAO y As30D) que presenta una diferente dependiente de fosforilación oxidativa para la obtención de su energía metabólica (FAO mayor C9 mayor As30D). La estaurosporina induce apoptosis a través de mecanismos tanto dependientes como independientes de caspasas en las líneas celulares C9 y FAO. La línea celular As30D es resistente a la apoptosis inducida por esta droga. La oligomicina, un inhibidior específico de la H+ -ATP sintasa previene la muerte celular en células C9 y FAO sugiriendo que la actividad de este complejo es importante para la ejecución de la apoptosis. Sin embargo, la oligomicina no previene el rápido hinchamiento mitocondrial ni la liberación de componentes pro-apoptóticos de la mitocondria. Por otro lado, la estaurosporina induce la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS). En estas condiciones se detecta la modificación covalente de pr