Nucleasas químicas derivadas de complejos de cu(ii) con sulfonamidas n-sustituidas

Resum

El objetivo general de la investigación realizada en esta Tesis doctoral ha sido la obtención de complejos de Cu(II) que presenten actividad nucleasa, establecer la forma de interacción con el ADN y el mecanismo de rotura de la doble hélice catalizado por éstos. La capacidad de digerir el ADN resulta de gran interés en el campo de la medicina y la biotecnología por el uso potencial de los complejos metálicos como agentes antitumorales. En primer lugar se sintetizaron y caracterizaron sulfonamidas N-sustituidas a partir de adenina, 2-amino-4,5-dimetiltiazol y 2-picolilamina. Con estos ligandos se han preparado distintos complejos de Cu(II) mononucleares y polinucleares que han sido caracterizados estructural y espectroscópicamente. En particular, destacan las propiedades magnéticas de los complejos polinucleares. Con los complejos caracterizados, se ha estudiado la capacidad y la forma de interacción de los nuevos complejos con el ADN utilizando para ello la técnica de espectroscopía de fluorescencia, el análisis de la temperatura de fusión del ADN y medidas mecánicas como la viscosimetría. Donde se ha observado la distinta forma de interacción de los complejos con los ácidos nucleicos (intercalación, interacción por los surcos o interacción de esfera externa). Se ha ensayado la actividad nucleasa de los complejos mediante la técnica de electrofóresis en gel de agarosa. También se ha estudiado cinéticamente el proceso de degradación de la forma superenrrollada del ADN a forma circular. Se ha estudiado la actividad nucleasa de los complejos en presencia de distintos agentes inhibidores para establecer las especies reactivas de oxígeno implicadas en la escisión de la doble hélice. Los resultados ponen de manifiesto la elevada actividad nucleasa de los complejos y las especies implicadas en la degradación del ADN. Se ha planteado un mecanismo de reacción.