Regulación de la actividad bioquímica de los factores de intercambio de la familia de ras-grf mediada por cdc42

Resum

Los intercambiadores Ras-GRF son reguladores positivos de la actividad de GTPasas Ras como H-Ras, TC21 y Rac1. Dichas GTPasas median en numerosos procesos biológicos de vital importancia para la célula como pueden ser la proliferación, diferenciación o la movilidad celular. Los objetivos desarrollados en este Trabajo han sido: 1) Dilucidar la presencia física y funcionalidad bioquímica sobre H-ras y TC21 de Ras-GRF1 y Ras-GRF2 en los distintos microdominios de membrana plasmática y endomembranas; 2) estudiar el papel de los distintos dominios de ras-GRF1 y Ras-GRF2 en la regulación de su actividad sobre TC21; y 3) estudiar la posible interacción entre Cdc42 y Ras-GRF y las consecuencias en la actividad bioquímica de ambas proteínas resultantes de dicha interacción. La base experimental desarrollada en este Trabajo ha permitido obtener las siguientes concluiones: 1) Ras-GRF1y Ras-GRF2 se asocian a los dominios subcelulares de balsas lipídicas, membrana desordenada, caveolas y retículo endoplasmático,donde pueden catalizan la activación de H-Ras y TC21;2) los dominios PH1 y DH regulan la actividad de Ras-GRF1 sobre TC21; 3) el acceso a la fracción particulada de Ras-GRF1 y Ras-GRF2 no se corresponde con su actividad sobre H-Ras y TC21; es probable que dicha actividad dependa de su localización en las proximidades de las distintas mebranas celulares; 4) Ras-GRF1 y Ras-GRF2 son capaces de interaccionar con Cdc42 inactivo a través de sus motivos DH-PH; dicha interación regula su actividad catalítica sobre H-ras y TC21, probablemente inhibiendo su acceso a dichas GTPasas en las distintas plataformas de membrana; y 5) Ras-GRF compite con GEFs de la familia Rho por la interacción con Cdc42, regulando su activación.