Análisis genético de los parálogos y caracterización funcional de LGI1

Resum

En 1995 se describió en Nature Genetics una forma familiar de epilepsia de herencia autosómica dominante [Ottman, 1995]. Se trataba de una forma de epilepsia parcial, aunque con cierta frecuencia las crisis observadas también se generalizaban, con un origen localizado en la parte lateral del lóbulo temporal. Clínicamente, la característica más destacada de esta forma de epilepsia era la aparición de auras auditivas que solían preceder las crisis epilépticas. El análisis genético de dicha forma familiar permitió en 2002 a nuestro laboratorio [Morante-Redolat, Gorostidi-Pagola, 2002], a la vez que otro [Kalachikov, 2002] identificar el gen cuyas mutaciones causaban este síndrome epiléptico. El gen identificado, LGl1, presenta una expresión mayoritaria en el cerebro y pertenece a una nueva subfamilia de proteínas que podrían estar implicadas en la aparición de síndromes epilépticos. Al resto de proteínas se les denominó LGl2, LGl3 y LGl4. Al comienzo de esta tesis se sabía muy poco acerca de la naturaleza de este gen, y nada sobre la localización subcelular o función de los genes parálogos. Por tanto decidimos por una parte, llevar a cabo una caracterización inicial acerca de la naturaleza de los parálogos de LGl1 (análisis in silicio, clonación y posterior estudio de secreción y análisis de modificaciones postraduccionales de las proteínas LGl2, LGl3 y LGl4) y un análisis genético en estos 3 nuevos genes en familias que presentaban un fenotipo clínico compatible con ADLTE pero no presentaban ni ligamiento a 10q24 ni mutaciones en LGl1. Y por otra parte, decidimos caracterizar funcionalmente LGl1 con el objetivo último de determinar el mecanismo por el cual mutaciones en LGl1 causan este síndrome epiléptico. Las proteínas de la familia LGl son secretadas pro neuronas y están glicosiladas. Mutaciones en la secuencia de las mismas, hacen que se queden retenidas en el interior celular, de manera que la secreción es u