Genética y Bioquímica de "Streptomyces clavuligerus" relación con la regulación catabólica y la producción de antibióticos

  1. GARCIA DOMINGUEZ, MODESTA
Dirigida por:
  1. Juan Francisco Martín Martín Director/a
  2. Paloma Liras Padín Directora

Universidad de defensa: Universidad de León

Año de defensa: 1990

Tribunal:
  1. Santiago Gascon Muñoz Presidente/a
  2. José María Castro González Secretario
  3. José Antonio Gil Santos Vocal
  4. Tomas Villa Vocal
  5. Ramón Santamaría Sánchez Vocal

Tipo: Tesis

Teseo: 24783 DIALNET

Resumen

Streptomyces clavuligerus nrrl-3585 es un actinomiceto incapaz de crecer en glucosa, productor de varios antibioticos entre los que se incluyen el p-lactamico cefamicina c y el inhibidor de p-lactamasas acido clavulanico, ademas de otros metabolitos secundarios. Por tratamiento de esporas de s. Clavuligerus con n-metil-n-nitro-n-nitrosoguanidina se aislo un mutante, al que se denomino s. Clavuligerus gutl, que a diferencia de la cepa parental es capaz de crecer en glucosa y galactosa. S. Clavuligerus nrrl-3585 y s. Clavuligerus gutl crecen sobre maltosa, poseen un sistema de transporte especifico y plenamente funcional para dicho azucar, puesto que la maltosa es hidrolizada por una -glucosidasa intracelular; por tanto s. Clavuligerus posee una via normal de catabolismo de glucosa. Ambas cepas poseen ademas un doble sistema de union de glucosa con alta y baja afinidad, respectivamente, por este carbohidrato; las afinidades de estos sistemas son similares en ambas cepas. Tanto la capa silvestre como el mutante poseen actividad glucosa-quinasa y fosforila glucosa "in vitro". Experimentos de transporte de glucosa indican que s. Clavuligerus nrrl-3585 es incapaz de utilizar glucosa, debido a la existencia de un sistema deficiente de translocacion de glucosa al espacio intracelular. La biosintesis de cefamicina c en s. Clavuligerus gutl no se ve regulada por la presencia de altas concentraciones de glucosa enel medio de cultivo. Se ha demostrado la existencia de regulacion catabolica por glucosa de enzimas implicadas en la utilizacion de azucares, que parece ser ejercida en s. Clavuligerus por metabolitos fosforilados de glucosa. Por otra parte, se ha desarrollado un sistema de transformacion eficiente en s. Clavuligerus, que permite obtener frecuencias de transformacion de 5x10 transformantes-ug de dna, y se ha demostrado la existencia de un fuerte sistema de restriccion-modificacion en esta cepa. Por ultimo, se procedio a la clona