Determinación de las concentraciones séricas del Imatinib y su correlación con la toxicidad hematológica

Zusammenfassung

El Imatinib es un inhibidor de la tirosina quinasa Ver-Abl responsable de la Leucemia Mieloide Crónica (LMC). Ha demostrado una gran eficacia en el tratamiento de esta enfermedad aunque han aparecido efectos secundarios asociados a su uso. En el presente trabajo hemos desarrollado un método para determinar la concentración sérica de Imatinib y de su metabolito activo, el N-desmetil-Imatinib, en pacientes con LMC Ph+, con el fin de establecer una relación entre concentraciones séricas y efectos adversos hematológicos, De este modo pretendemos establecer un rango de concentraciones optimo en el que el paciente tenga menos probabilidad de presentar estos efectos. Queremos demostrar con nuestros resultados que la nonitorización de las concentraciones de Imatinib en sangre es útil a la hora de conocer de manera individualizada lo que ocurre en cada uno de nuestros pacientes. Para ello se utilizo la técnica de HPLC en fase reversa y condiciones isocráticas acoplada a un sistema de detección ultravioleta-visible fijado a una longitud de onda de 240mm. Se realizaron diversos estudios de precisión, exactitud, linealidad, recuperación y robustez para garantizar la fiabilidad analítica de la técnica, demostrando que proporciona resultados que cumplen los criterios de calidad analítica para su aplicación a nivel clínico recomendados por la conferencia Internacional para la validación de procedimientos analíticos. Se analizaron las concentraciones de Imatinib y su metabolito activo en 114 muestras de suero de 36 pacientes con LMC Ph+ en tratamiento con Imatinib (19 hombres y 17 mujeres). Se decidió hacer un seguimiento mínimo de seis meses de cada paciente. Se considero que un paciente estaba en situación de anemia cuando los niveles de hemoglobina eran inferiores a 12 g/dL. La neutropenia se definió como valores de neutrófilos inferiores a 1000/mm3 y la trombopenia cuando las plaquetas presentaron valores inferiores a 100.000/mm3. Se dieron 21 casos de anemia (58,3%) 6 de trombopenia (16,5%) y 3 de netropenia (8,3%). Los pacientes sin anemia presentaron una media de concentración de Imatinib de 1.41mg/mL, mientras que los casos de anemia tuvieron una concentración de fármaco de 2.10m g/mL (p=0.015). Existieron diferencias significativas entre las medias de las concentraciones de Imatinib, 1,70 mg/mL en ausencia de trombopenia y 2,60mg/mL en presencia de este efecto adverso (p=0.047). Se observaron diferencias entre las concentraciones de Imatinib en los grupos definidos como presencia o ausencia de neutropenia pero estas no fueron estadísticamente significativas. Al 66.6% de los pacientes con concentraciones séricas de Imatinib superiores a 3mg/mL se les suspendió el tratamiento por presencia de efectos adversos graves relacionados con el fármaco (p=<0.001). Como conclusión, creemos que se puede evitar la aparición de efectos adversos de anemia y trombopenia manteniendo las concentraciones séricas de Imatinib en un rango inferior a 2 mg/mL en pacientes con LMC. Atendiendo a nuestros datos podríamos afirmar que al superar las concentraciones séricas de 3 mg/mL se corre un riesgo muy alto de tener que suspender el tratamiento por aparición de efectos adversos graves. Seria importante para un correcto manejo del paciente tratar de mantener sus concentraciones séricas siempre por debajo de esta cifra limite. De este modo fijamos como posible rango terapéutico un intervalo de concentraciones de Imatinib comprendido entre 0.57mg/mL y 2 mg/mL. Paralelamente se realizo un estudio del efecto del Imatinib sobre la hematopoyesis normal in Vitro utilizando células CD34+ obtenidas de 12 donantes sanos. Se realizaron diferentes cultivos de setas células en presencia de Imatinib a concentraciones de 2mg/mL y 10mM añadiendo factor estimulante de colonias granulocíticas y eritropoyetina. En el estudio de las CFU-GM se observo que el número medio de colonias crecidas en cada placa control fue de 99.75 colonias, mientras que en presencia de Imatinib el número disminuyo hasta una media de 35.08 colonias por placa a concentraciones de fármaco de 2mM (p=0.028) y de 13.50 colonias por placa a concentraciones de 10mM (p=0.005). Se encontraron también diferencias entre las concentraciones de 2mM y 10mM (p=0.014) lo que sugiere una supresión dosis dependiente. Esta inhibición fue mucho más llamativa en los cultivos a los que se añadió eritropoyetina. Las CFU ¿E disminuyeron de 142.17 colonias en la placa control a 0.82 y 0.42 colonias cuando se añadió Imatinib a 2 mM y 10mm respectivamente (p=0.003). El efecto inhibidor del Imatinib sobre las colonias eritroides CFU-E observado en nuestro estudio in Vitro explica la correlación encontrada entre las concentraciones altas de Imatinib en suero y la presencia de anemia en los pacientes con LMC incluidos en el estudio. Creemos que es de gran utilidad la monitorización de las concentraciones séricas de Imatinib para evitar la aparición de efectos secundarios de anemia y trombopenia y para controlar la variabilidad interindividual que existe en este tipo de pacientes.