Inhibición de la proteína anti-apoptótica MCL1 en mieloma múltiple y sinergia terapéutica con bortezomib y panobinostat

Résumé

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia caracterizada por la proliferación clonal de células malignas en la medula ósea acompañada de la secreción y presencia de inmunoglobulina monoclonal en sangre (proteína M). Como consecuencia de su acumulación en distintos órganos y tejidos, presenta unas manifestaciones clínicas conocidas como CRAB. Representa alrededor del 18% de las neoplasias hematológicas, afectando a personas en edad avanzada, con una mediana de edad de 69 años. El MM está precedido por 2 enfermedades premalignas, las cuales tienen diferentes características, aunque ambas entidades son asintomáticas. Las translocaciones que afectan al gen de la cadena pesada de la inmunoglobulina (IGH) y una serie de genes entre los que se encuentran MMSET/FGFR3, CCND1, c-Maf y MafB y la hiperdiploidía son las causas primarias más importantes. El tratamiento de los pacientes con MM se establece dependiendo de diferentes factores pronóstico y predictivos, siendo el grado de la respuesta terapéutica uno de los factores más importantes y hoy en día alcanzar la remisión completa es el objetivo ideal para conseguir el aumento de supervivencia de los pacientes. Sin embargo, el MM se considera en la actualidad una enfermedad incurable, si bien la mejor estratificación terapéutica y la introducción de nuevas terapias han conseguido prolongar la supervivencia de la mayoría de los pacientes durante la última década. Actualmente existe un número elevado de fármacos dirigidos que han demostrado eficacia en ensayos clínicos. En la actualidad, el uso de fármacos moduladores de la apoptosis es una opción terapéutica que está cobrando cada vez más fuerza en el tratamiento de las neoplasias hematológicas. Así pues, mientras que en patologías como las leucemias o linfomas se ha identificado a BCL2 como principal proteína de reguladora de la apoptosis, característica en la cual se basan los resultados de los inhibidores de esta molécula en dichas enfermedades, en el caso del MM continua sin esclarecerse el papel que tienen las distintas proteínas de regulación de esta vía de señalización. En este proyecto de tesis hemos realizado un estudio de profiling BH3 en 20 líneas celulares derivadas de pacientes de MM, con la intención de identificar y estudiar cuál de las tres principales moléculas de la familia de BC2 reguladoras de la apoptosis (BCL2, BCLxL o MCL1) tiene un papel predominante en este patología. A su vez, nos propusimos estudiar preclínicamente la combinación entre tres inhibidores apoptóticos (ABT-199, S63845 y A-1331852) y fármacos actualmente aprobados para el tratamiento de esta enfermedad y analizar su mecanismo de acción. Nuestros resultados demostraron una diferencia muy significativa en favor de la molécula MCL1 en comparación tanto con la inhibición de BCL2 como con BCLxL (p<0,0001), lo que sugiere un papel predominante de esta proteína en la regulación de la apoptosis en las células de MM. En la segunda parte de nuestro proyecto, realizamos un análisis de distintas combinaciones entre cada uno de los tres inhibidores proapoptóticos y 4 fármacos: bortezomib, panobinostat, dexametasona y lenalidomida. Este estudio demostró que la combinación del inhibidor S63845 tanto con bortezomib como con panobinostat resultaba sinérgico en el 100% de las líneas probadas, mientras que dexametasona mostró sinergia en un bajo porcentaje de ellas y lenalidomida no tuvo ningún tipo de sinergia. El análisis estadístico comparativo demostró que panobinostat tiene mayor potencial sinérgico que bortezomib, si bien la combinación de cualquiera de los dos con el inhibidor apoptótico S63845 mostró una gran eficacia, llegando en ambos casos incluso a revertir la resistencia que algunas células tenían al inhibidor apoptótico S63845. Por último, el mecanismo de acción de la combinación de bortezomib o panobinostat con el inhibidor de MCL1 sugiere una activación conjunta de la apoptosis.