Efectos de la administración intraperitoneal de nigrina b sobre la absorción intestinal de vitamina b6 en ratones

Resumen

De los saúcos se han aislado numerosas fitohemaglutininas o lectinas con actividad antirribosómica o sin ella. Las lectinas de Sambucus nigra con actividad antirribosómica N-glucosidásica son SNA I y nigrina b. La administración intravenosa de nigrina b a ratones produce toxicidad reversible en el intestino delgado. Ello llevó a considerar la posibilidad de que los efectos de nigrina b pudieran constituir un modelo de daño-regeneración intestinal diferente al de los modelos químicos. El modelo de nigrina b en ratones es de tipo enzimático, se realiza desde el plasma, es reversible y se solapa con el ciclo fisiológico de destrucción regeneración de la mucosa intestinal. Nuestra hipótesis general de trabajo es que la administración de nigrina b a los ratones produce un cuadro intestinal reversible que puede utilizarse para estudiar la absorción de nutrientes y fármacos. Por ello creemos que es un modelo ideal para el estudio comparativo con los modelos químicos y para el estudio de la regeneración intestinal. Los objetivos del trabajo fueron: a) preparar y caracterizar la nigrina b de Sambucus nigra L uilizando corteza seca como material de partida; b) caracterización del daño-regeneración intestinal promovido por la administración intraperitoneal de nigrina b como modelo intestinal reversible; c) desarrollar un procedimiento de determinación de vitamina B6 por cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC); d) aplicación del modelo de administración intraperitoneal de nigrina b a la absorción de vitamina B6. La administración intraperitoneal de dosis subletales de nigrina b (10 mg/kg) provoca un cuadro tóxico en ratones equivalente al que se observa tras la administración intravenosa de 5 mg/kg. El blanco de nigrina b intraperitoneal (10 mg/kg) es el intestino, afectándose más el delgado que el grueso. El efecto tóxico de nigrina b se ejerce de manera secuencial, primero sobre las criptas del intestino delgado y después sobre los villi y las criptas del intestino grueso. Los efectos subletales de nigrina b a la dosis indicada tras su administración intraperitoneal, son reversibles recuperándose el peso de los animales tratados a los nueve días. El máximo de absorción del colorante azul de Evans administrado por vía IV y utilizado como colorante vital, por todo el tracto gastrointestinal en ratones tratados con nigrina b, coincide con los efectos histológicos globales, es decir la degradación de criptas de intestino delgado, villi y criptas de intestino grueso, que es máxima a las 48 h. Respecto a la captación de vitamina B6 hemos encontrado que la filtración a través de membrana de nylon de 0,22 µm de diámetro es un recurso adecuado para la preparación y limpieza de muestras plasmáticas de ratón para cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). La administración de 100 mg/kg en bolo oral de vitamina B6 proporciona niveles plasmáticos sensibles para la detección mediante HPLC-UV. La administración intraperitoneal de 10 mg/kg de nigrina b produce una notable reducción en los niveles plasmáticos de vitamina B6 que coincide temporalmente con el daño de las criptas del intestino delgado y que se recupera cuando se recuperan éstas, indicando que el intestino delgado es el componente mayoritario en la absorción de la vitamina B6. Dosis orales de 100 mg/kg de vitamina B6 proporcionan niveles plasmáticos equivalentes a dosis hasta cuatro veces inferiores. A pesar de ello, la nigrina es capaz de reducir la concentración plasmática de la vitamina, lo que demuestra claramente que la vitamina no se absorbe por difusión sino por un proceso mediado por transportador. Nuestros resultados permiten afirmar que la nigrina a las 24 h después de su administración reduce el número de células de trasportador de la vitamina B6 en las criptas de intestino delgado y por lo tanto estas criptas son el lugar preferente de absorción.