Papel de las fosfolipasas a2 en la liberación de ácido araquidónico y la expresión de ciclooxigenasa-2 en macrófagos de ratón

Resumen

En este trabajo se utilizan 10 agonistas de receptores Toll-like para definir el papel de las fosfolipasas A2 en la liberación de ácido araquidónico en macrófagos. El tratamiento de P388D1 y RAW 264.7 con pirrofenona, inhibidor selectivo de la cPLA2¿ y escalaradial, inhibidor de la sPLA2, muestran que la contribución de estas fosfolipasas a la liberación de ácido araquidónico depende del TLR a través del que se está produciendo la activación. No se observan cambios en la liberación de ácido araquidónico cuando se utiliza BEL, inhibidor de la iPLA2. Además se identifica la lisofosfatidilcolina como el mediador de la sPLA2-V implicado en la inducción de COX-2 en macrófagos estimulados con LPS. La inhibición de la sPLA2-V con RNA de interferencia o con escalaradial bloquea la expresión de COX-2 y la activación del factor de transcripción c-Rel inducida por LPS, y ambas se recuperan selectivamente con un análogo no hidrolizable de lisofosfatidilcolina. Adicionalmente, el escalaradial evita la fosforilación de ERK1/2 y cPLA2¿ en respuesta a la activación a través de TLRs, mecanismo que depende del receptor a través del que se produce esta activación, lo que indica un mecanismo de regulación de la sPLA2-V y cPLA2¿ dependiente de TLR. Estos resultados sugieren un modelo en el que la cPLA2¿ es la principal responsable de la liberación de ácido araquidónico en macrófagos. La sPLA2-V contribuye amplificando este proceso mediante la hidrólisis de los fosfolípidos y la regulación de la fosforilación secuencial de ERK1/2 y cPLA2¿. Por otro lado, la sPLA2-V hidroliza los fosfolípidos generando lisofosfatidilcolina, la cual regula la expresión de COX-2 por un mecanismo que implica la actividad transcripcional de c-Rel.