Estudio de metilación en los genes CDH1, P15, P16 y BIK en pacientes afectos de mieloma múltiple /

Zusammenfassung

El Mieloma Múltiple (MM) es una neoplasia hematológica, que en la gran mayoría de casos, la enfermedad viene precedida de una alteración de células plasmáticas (CP) asintomática, la Gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI). Así mismo se ha descrito un estadio intermedio entre GMSI y MM denominado Smoldering Multiple Myeloma (SMM). Se desconoce por qué solo algunas GMSI progresan a MM. Se han elaborado guías de estratificación de los pacientes con marcadores de progresión clínico-biológicos, como los niveles de componente monoclonal, el tipo de cadenas ligeras libres y el porcentaje y atipias de las CP. Sin embargo, y debido a la gran heterogeneidad que presenta esta enfermedad, no existen marcadores de progresión fiables. La inactivación por metilación de los promotores de genes supresores de tumor podría estar implicada en la progresión y/o evolución de la enfermedad. Estudios de metilación global en MM de la literatura describen un aumento del porcentaje de pacientes con metilación, en algunos de estos genes a lo largo de la evolución de la enfermedad. El estudio del patrón de metilación de determinados genes supresores de tumor podría ayudar a comprender los mecanismos implicados en la evolución del MM. En el presente estudio se ha analizado la presencia de metilación en el promotor de los genes supresores de tumor CDH1, P15, P16 y BIK en una serie de 103 pacientes afectos de MM, GMSI o SMM. El análisis de metilación se ha realizado mediante MS-PCR con DNA obtenido del cultivo celular de médula ósea tras fijación con Carnoy, siendo el primero en MM que utiliza este tipo de muestras. Se ha establecido la frecuencia de casos con metilación en estadios asintomáticos y en MM. Se ha comparado la frecuencia de metilación en pacientes con MM estudiados al diagnóstico con la de pacientes estudiados durante el seguimiento y resistentes al tratamiento o en recaída. Asimismo se ha evaluado la posible relación entre la metilación de estos genes y variables clínico-biológicas para establecer su posible valor pronóstico. Las frecuencias de casos con metilación en P15 y P16 mostraron diferencias significativas entre estadios premalignos y MM. Es de destacar que en cuatro de los pacientes, de los que se disponían muestras en dos estadios diferentes de la enfermedad, se observó metilación en BIK únicamente en aquellas correspondientes a la enfermedad resistente a tratamiento. Ello sugiere que la metilación de algunos genes supresores de tumor podría tener un papel importante en la progresión de determinados clones de CP resistentes a tratamiento. Al analizar la relación entre las variables clínico-biológicas y metilación, solamente se encontró correlación en toda la cohorte de pacientes (pre-MM y MM) entre metilación en P15 y niveles elevados de LDH así como entre P16 y niveles elevados de b2-microglobulina y porcentaje elevado de CP. Además la presencia de tres o cuatro genes metilados estaba asociada a una supervivencia inferior en los pacientes. Ello sugiere que la metilación de varios genes supresores de tumor podría conferir un fenotipo más agresivo. Es de destacar que la metilación concomitante en P16 y BIK en pacientes afectos de MM tenía un impacto más adverso en la SG que roza la significación como factor pronóstico independiente. Éste hecho apoyaría la hipótesis de que la metilación de determinados genes supresores de tumor podría tener un papel importante en la supervivencia de determinados clones de CP porque serían resistentes al tratamiento.