Estudio comparado de la expresión de la proteína priónica celular en el tracto gastroenteropancreático de mamíferos

Resum

#TITULO: ESTUDIO COMPARADO DE LA EXPRESIÓN DE LA PROTEINA PRIÓNICA CELULAR EN EL TRACTO GASTROENTEROPANCREATICO DE MAMÍFEROS #RESUMEN: ESTUDIO COMPARADO DE LA EXPRESIÓN DE LA PROTEÍNA PRIÓNICA CELULAR EN EL TRACTO GASTROENTEROPANCREATICO DE MAMÍFEROS Aunque en las últimas décadas se han realizado muchos estudios sobre las patologías priónicas y se han producido importantes avances, lo cierto es que el conocimiento de las enfermedades priónicas sigue siendo bastante limitado. Cuál es la función de la PrPc, cómo entra la PrPsc en el organismo y que moléculas y tipos celulares están implicados en la replicación y neuroinvasion del prion son algunas de las cuestiones todavía por resolver. La implicación del tracto "gastrointestinal y la necesidad de la expresión de la PrPc para el desarrollo de la enfermedad son dos hechos incuestionables en la patogénesis por vía oral de las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles. Sin embargo, existen pocos estudios, y además parciales, de la expresión de la PrPc en la pared digestiva de mamíferos. Por otro lado, los resultados obtenidos son dispares, ya que se ha descrito la presencia de la PrPc en tipos celulares distintos, incluso en una misma especie. El conocimiento de la localización exacta de la PrPc a lo largo de la pared digestiva es necesario para comprender cómo y dónde tiene lugar la incorporación de la PrPsc y cómo se produce el paso de esta proteína de células no-neuronales a neuronas. Además, el conocimiento de los tipos celulares que expresan la PrPc puede aportar datos sobre su función fisiológica. Por ello, nuestra hipótesis de trabajo fue que la PrPc se expresa en el tracto gastroenteropancreático (tgep) de mamíferos y que pueden existir diferencias en los tipos celulares que expresan esta proteína en especies distintas. Para comprobar esta hipótesis, se planteó un objetivo general que fue el estudio de la expresión de la PrPc en el tracto digestivo de tres especies de mamíferos: rata, mono y vaca. Este objetivo general se desglosó en los siguientes objetivos concretos: (I) identificar las regiones del TGEP que expresan la PrPc, tanto la proteína como el ARNm, en las tres especies; (II) localizar y caracterizar el/los tipo(s) celular(es) en el/los que se localiza la PrPc en aquellas regiones en las que se detecte expresión; (III) determinar los tipos celulares que expresan el ARNm de la PrPc en rata y comparar estos resultados con los de la localización de la proteína; (IV) realizar un estudio comparado entre las tres especies con los resultados obtenidos. Este trabajo constituye la primera descripción completa de la expresión de la isoforma celular de la PrP en el TGEP de animales sanos. Mediante técnicas inmunocitoquímicas y de inmunofluorescencia hemos detectado la PrPc en células endocrinas y el sistema nervioso entérico en el estómago e intestino de rata, mono y vaca, así como en los islotes de Langerhans pancreáticos de mono y rata. Los niveles de la proteína en el TGEP son muy inferiores a los del cerebro y disminuyen desde el estómago hacia el intestino grueso y el páncreas. Las técnicas de RT-PCR en las tres especies y de hibridación insitu en la rata han demostrado la expresión del ARNm de la PrPc en todas las regiones del TGEP. La combinación de la hibridación con la inmunofluorescencia ha ratificado la expresión de la PrPc en subpoblaciones concretas de células neuroendocrinas. El patrón de expresión obtenido es muy similar en las tres especies animales estudiadas, lo que indica una estrecha regulación de la expresión de esta proteína. Además, la presencia de la PrPc en células neuroendocrinas sugiere una posible participación de estas células en la patogénesis de las enfermedades priónicas de transmisión oral