Metabolismo de la biotina en células nerviosas cultivadas

Resum

El objetivo de esta tesis ha sido estudiar el metabolismo de biotina en celulas nerviosas. La biotina es una vitamina esencial, implicada en procesos de transferencia de co2. En humanos se han descrito errores innatos del metabolismo asociados a las enzimas implicadas en el metabolismo de biotina. Todos ellos tienen como caracteristica comun el rapido y grave deterioro neurologico. Sin embargo, la evidente dificultad para realizar estudios bioquimicos en snc de pacientes ha planteado la necesidad de abordar el estudio utilizando modelos mas simples. En base a esto los objetivos de esta tesis han sido: -caracterizacion de cultivo primario de astrocitos, estudiando el crecimiento, pureza y capacidad funcional de las celulas obtenidas tras tres semanas de cultivo. -estudio del metabolismo dependiente de biotina, estudiando la presencia de enzimas dependientes de biotina y caracterizando el proceso de transporte de biotina que parece transcurrir mediante difusion facilitada, la cinetica de biotinilizacion de apocarboxilasas. Y por ultimo, determinando la actividad biotinidasa. -establecimiento de un modelo experimental de deficiencia en astrocitos cultivados, consiguiendo un bloqueo en las tres enzimas mitocondriales asociado a una excrecion aumentada de 3-hiva. -estudio sobre el efecto de la deficiencia en biotina sobre el metabolismo intermediario de celulas gliales, encontrando disminucion en los niveles de aminoacidos relacionados con el glutamato.