Capacidad pronóstica de los microRNAs circulantes en la neumonía adquirida en la comunidad

Zusammenfassung

Los pacientes con neumonía adquirida en la comunidad (NAC) desarrollan una respuesta inflamatoria sistémica que se relaciona con la mortalidad. Los microRNAs (miRNAs) participan en la inflamación como moduladores de la respuesta inmune, pero su patrón de expresión y su papel como biomarcadores en la NAC no ha sido completamente caracterizado. OBJETIVO principal Determinar la utilidad de los miRNAs circulantes como biomarcadores pronósticos en pacientes hospitalizados por NAC. OBJETIVOS específicos (1) Caracterizar el perfil de expresión de una selección de miRNAs circulantes al ingreso en pacientes hospitalizados por NAC. (2) Determinar la capacidad predictiva de los miRNAs circulantes como marcadores pronósticos de mortalidad intraingreso, a 30 días y a un año. (3) Estudiar la asociación de la expresión de los miRNAs circulantes con el desarrollo de ictus o infarto agudo de miocardio durante el primer año tras el ingreso por NAC. (4) Buscar asociación entre los miRNAs circulantes y la causa etiológica de la NAC. (5) Comparar la capacidad pronóstica de los miRNAs circulantes con la de escalas clínicas pronósticas habituales en NAC, CURB-65 y Pneumonia severity index. MÉTODOS Estudio observacional prospectivo sobre una cohorte de 153 pacientes ingresados por NAC. A todos los pacientes se les realizó una extracción de sangre el primer día del ingreso. Se purificó RNA de pequeño tamaño a partir de plasma mediante protocolo basado en columnas (Exiqon). Se evaluó la calidad del proceso (QC control) y 117 muestras pasaron la prueba. Se testó un panel de 752 miRNAs humanos con el fin de determinar un patrón preliminar de expresión diferencial de miRNAs entre pacientes con NAC de diferente evolución y se eligieron 25 miRNAs candidatos, procedentes del estudio exploratorio y de la literatura científica. La expresión de miRNAs se analizó mediante RT-PCR. La cantidad relativa de cada miRNA se calculó con ΔCt = Ct miRNA – Ct UniSp2 y los datos finales se calcularon mediante la fórmula 2-ΔCt. Se recogieron diversas variables clínicas durante el ingreso. Las variables dependientes principales fueron mortalidad intraingreso, en los primeros 30 días y a 1 año de seguimiento, además de la aparición de eventos cardiovasculares mayores (IAM o ictus) al año de seguimiento. Se estudió la asociación entre mortalidad y niveles de miRNAs circulantes mediante análisis uni y multivariante, con la construcción de un modelo de regresión logística. Se comparó el modelo propuesto con escalas clínicas pronósticas ya establecidas, mediante elaboración de curvas ROC y comparación de áreas bajo la curva (AUC). El programa estadístico utilizado fue STATA v15. RESULTADOS Se incluyeron 117 pacientes con una media de edad de 74,7 años [DE 15,9], predominantemente hombres (59%). Su PSI medio fue de 100,9 [DE 34,6] y la media del índice de Charlson modificado fue de 2.9 [DE 3,0]. Streptococcus pneumoniae fue responsable de 15 NACs (12,8%); hasta 12 pacientes murieron en los 30 días de seguimiento (10,3%). De los 25 miRNAs analizados, solo 10 tuvieron resultados completos (miR107, miR17-5p, miR21, miR144-3p, miR16-5p, miR486, miR20a, miR34a-3p, miR106b-5p, miR146a). MiR17-5p era significativamente menor en pacientes con NAC neumocócica (p=0,025), mientras que miR-146a y miR-16-5p, mostraron asociación estadística con la mortalidad a 30 días (p<0,001 y p=0,010, respectivamente), de forma que valores elevados de ambos se asociaron con mayor supervivencia. No se encontró colinelialidad entre los miRNAs seleccionados ni interacciones significativas entre variables de interés. La asociación con mortalidad se mantuvo para el miR-16-5p (p=0,021) en el análisis multivariante ajustado por edad, sexo y antecedente de broncoaspiración. Se elaboró una curva ROC del modelo estimado final y se comparó la capacidad predictiva para mortalidad a 30 días con la de otras escalas pronósticas conocidas. Se encontró una excelente AUC del modelo multivariante ajustado (AUC=0,954), mejor que las de las escalas pronósticas PSI (AUC=0,799) y CURB-65 (AUC=0,722). No se encontró asociación entre los niveles de miRNAs circulantes y eventos cardiovasculares mayores; tampoco con mortalidad intraingreso o al año de seguimiento. CONCLUSIONES Niveles elevados de miR-146a-5p y miR-16-5p al ingreso por NAC se asocian con una menor mortalidad a los 30 días de seguimiento. Estos dos miRNAs podrían ser utilizados como biomarcadores de buena evolución en sujetos hospitalizados por NAC.