Estudio del efecto protector del embarazo y del uso de análogos de la somatostatina frente al cáncer de mama

Résumé

La Tesis Doctoral estudia el efecto protector que ejerce el embarazo frente al cáncer de mama, y además, trata de potenciar dicho efecto protector mediante la administración de análogos de la somatostatina. Para llevar a cabo este estudio se han empleado tres modelos diferentes de ratones: Un modelo knock out condicional para los genes Brca1 y P53. que remeda los tumores triple negativo que surgen en humanos; un modeno transgénico que sobreexpresa el oncogén ErbB2/Neu, que remeda tumores luminales B que sobreexpresan HER2; y un tercer modelo obtenido tras cruzar un ratón knock out para Brca1 y P53, con un ratón kcock in para la proteína roja fluorescente (RFP) bajo el promotor ROSA26, obteniendo un ratón que tiene de un 5 a un 30% de las células epiteliales de la mama delecionadas para los genes Brca1 y P53, y que además esas células van a expresar la proteína roja fuorescente. En estos modelos de ratón se evaluó el efecto protector del embarazo y además se les administraron análogos de la somatostatina. Se evaluó la susceptibilidad al cáncer de mama y posteriormente la evolución de la enfermedad, tanto en ratones nulíparas, aquellas que no han tenido embarazo, como en ratones multíparas, ratones que han pasado por dos periodos de embarazo, con sus correspondientes periodos de lactancia. Se evaluó la susceptibilidad en parámetros de latencia tumoral, incidencia tumoral, multiplicidad y número de tumores. Tras surgir el tumor se evaluaron fenotipos temporales (duración de la enfermedad y supervivencia), además de la tasa de crecimiento tumoral y la incidencia y multiplicidad de metástasis pulmonares. También se evaluó el subtipo histopatológico tumoral y el grado de diferenciación tumoral. Tras evaluar estos cambios, se identificaron cambios histológicos celulares y moleculares en mamas pretumorales de estos ratones. Se evaluaron parámetros de área epitelial ductal, proliferación y población recombianante de P53 como medida estimada de células premalignas iniciadoras de tumor. Después se evaluó el comportamiento de la edad sobre todos estos parámetros observados. Se evaluó el comportamiento de las diferentes subpoblaciones epiteliales de la mama mediante el marcaje con anticuerpos de membrana y citometría de flujo, y por último se realizó un RNA-Seq evaluando diferentes vías y genes relacionados con la prevención y susceptibilidad al cáncer de mama en los diferentes grupos de ratones empleados. Para completar el estudio, se realizaron diferentes ensayos in vitro, para evaluar viabilidad, proliferación y muerte celular, así como diferentes moléculas involucradas en estos procesos, en líneas celulares de mama, tumorales y no tumorales.