Caracterización de la proteína de membrana EMMPRIN en la adhesión célula-célula endotelial y en la integridad vascular

Resumen

Las adhesiones célula-célula son estructuras especializadas de la membrana celular a través de las cuales las células soportan y aplican fuerzas. En las células endoteliales estas fuerzas participan en la integridad vascular y en la regulación y dinámica de los complejos de adhesión ante diferentes estímulos, regulando así también la función de barrera del endotelio. Sin embargo, aún no están claramente establecidos los mecanismos por los cuales el citoesqueleto de actina y la tensión que este ejerce sobre las uniones regulan la formación de los complejos de adhesión, ni tampoco de cómo estos complejos a su vez influyen en la organización de la actina y la arquitectura celular. En esta tesis se caracteriza la expresión y regulación de EMMPRIN, una proteína transmembrana de la superfamilia de las inmonuglobulinas, en células endoteliales así como su localización en los contactos entre células endoteliales in vitro e in vivo. La ausencia de EMMPRIN produce alteraciones en la organización de las adhesiones dependientes de VE-cadherina y en la función de barrera de células endoteliales tanto in vitro como in vivo en los ratones deficientes en EMMPRIN. Estas alteraciones se deben a un desequilibrio en la tensión que soportan las uniones endoteliales, producido por una disminución en la actina organizada en las uniones y un aumento de las fibras contráctiles de actina-miosina en el interior celular; la relajación del citoesqueleto mediante inhibidores de la quinasa ROCK (Y27632) y de la unión de miosina a actina (Blebistatina) rescata el fenotipo de las uniones y de la función de barrera. Finalmente se identifica un nuevo complejo proteico formado por EMMPRIN y ¿-catenina capaz de interaccionar con el citoesqueleto de actina, que es reclutado de manera temprana a los contactos en formación entre células endoteliales, y que es necesario para la correcta organización del citoesqueleto de actina que sustenta los complejos de adhesión entre células endoteliales.