Mecanismos implicados en la senescencia celular de fibroplastos de ratón

Resumen

En el trabajo presentado en esta memoria, hemos analizado la senescencia prematura y mecanismos implicados en esta respuesta, en fibroblastos embrionarios de ratón. Hemos encontrado que el supresor de tumores p19 Arf es esencial para la respuesta antiproliferativa inducida por la expresión de oncogén Ras. La expresión de RasV12 produce un aumento en la expresión de p19 Arf, provocando a su vez la estabilización de p53, que induce la parada del ciclo celular. Hemos analizado el papel de p21Cip1 en la inmortalización y en la senescencia prematura inducida por Ras oncogénico, empleando fibroblastos embrionarios deficientes en p21Cip1. Hemos observado que p21Cip1 no es importante en estos procesos, ya que, como las células Wild-type (o silvestres), las células p21-/- entran en senescencia y requieren mutaciones adicionales para inmortalizarse, que generalmente afectan a p53, p16Ink4a ó p19Arf. Estas células responden a la expresión de RasV12 acumulando p53 y p16Ink4a, lo que produce una disminución del crecimiento. De acuerdo con esto, las células deficientes en p21Cip1 son resistentes a la transformación neoplásica producida por RasV12. Hemos examinado el estado funcional de p19Arf en las células derivadas de ratones deficientes en los exones 2 y 3 del locus INK4a/ARF. El interés de este estudio radicaba en que aún no se había determinado inequívocamente la funcionalidad de p19Arf en estas células, que son usadas para múltiples estudios. Hemos encontrado que estas células expresan un transcrito formado por el exón 1beta de p19Arf y por el exón 4 de otro gen, NTp16 (ver más adelante). La regulación de este transcrito quimérico ARF-NTp16 es normal, pero no hemos podido detectar la proteína. Estos resultados sugieren que las células INK4a/ARF-/- no conservan la funcionalidad de p19Arf. Hemos encontrado un gen, al que hemos denominado NTp16 (Next-To-p16), que se localiza en dirección 3' respecto al locus I