Ensayo en un único paso para la detección de fagocitosis - activación celular muerte celular
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Inventores/as:
- FUENTES GARCIA, MANUEL
- DIEZ GARCIA, PAULA
- Cristina Isabel Gonçalves Grunho Teodosio
- José Alberto Orfao de Matos Correia e Vale
- JARA ACEVEDO, RICARDO
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Universidad de Salamanca
info
Universidad de Salamanca
Salamanca, España
- Immunostep S.L
ES2824156T3 (11-05-2021)
EP3267195A1 (10-01-2018)
EP3267195B1 (10-06-2020)
E16382317 (05-07-2016)
Resumen
Procedimiento para la evaluación simultánea de citotoxicidad, modulación inmune y fagocitosis de un material usado como transportador de administración de fármacos en el cuerpo animal que comprende:
a) Obtener poblaciones celulares estimuladas mediante incubación de una muestra biológica procedente de un sujeto y que comprende células con el material a evaluar;
b) incubación de las poblaciones celulares estimuladas del paso a) con
- anticuerpos marcados con fluorocromos específicos de marcadores CD14, CD4, CD3 and CD45 y marcadores de modulación inmune seleccionados de TNFalpha, IFNγ, IL6, IL12, TNFβ, IL2, IL8, IL10, IL13 y IL16,
- inhibidor TAPI-2 de la secreción proteica, y
- marcadores de viabilidad celular,
donde cada marcador es detectado con un fluorocromo diferente,
c) pasar la población resultante del paso b) a través de un citómetro de flujo y medida de las diferentes emisiones fluorescentes en una única medida, y
d) evaluación del grado de células viables, células activadas y células fagocíticas en cada población celular a través de la determinación de la cantidad de señal fluorescente asociada a cada célula individual y a cada modulación inmune individual relacionada con el marcador usado.